Phương pháp 1: Phương pháp chiết xuất (Phương pháp hiện đang được sử dụng ở nước tôi; nó mang lại độ tinh khiết thấp hơn nhưng mang lại chi phí sản xuất thấp hơn.)
Chiết xuất dung dịch Oxytocin: Lấy 100 g bột tuyến yên khô và 30 g bột thạch anh cho vào máy nghiền bi, thêm nước cất. Thực hiện quá trình chiết bốn lần bằng cách sử dụng quy trình tương tự. Thể tích nước cất thêm vào cho mỗi bước như sau: 1,4 L cho hai lần chiết đầu tiên và 1,3 L cho hai lần chiết tiếp theo. Mỗi lần chiết được thực hiện trong 45 phút, sau đó ly tâm để thu chất lỏng; phần cặn còn lại sau đó sẽ được chiết tiếp. Bốn dịch chiết thu được được kết hợp để tạo ra dung dịch oxytocin. Tóm tắt: Bột tuyến yên sau khô [Nước, máy nghiền bi] → Chiết xuất oxytocin → Tách sắc ký.
Lấy 1.500 g zeolite tổng hợp-đã được xử lý trước, thêm 20 L dung dịch axit axetic 0,25% và-sau khi khuấy-đổ hỗn hợp vào cột trao đổi ion-. Khi mức dung dịch axit axetic đã giảm xuống mức cao hơn bề mặt của lớp zeolite từ 2–3 cm, thì đưa ngay dịch chiết oxytocin vào. Duy trì tốc độ dòng thích hợp và thu lấy dịch rửa giải màu trắng, đục (phần này chủ yếu chứa oxytocin; vì oxytocin có điểm đẳng điện [pI] là 7,7-trong khi vasopressin có pI là 10,9-vasopressin dễ dàng tạo thành các ion dương và do đó được hấp phụ lên cột). Ngay khi mức chất lỏng của dịch chiết giảm xuống bề mặt của lớp zeolit, ngay lập tức thêm nước cất và tiếp tục thu lấy dịch rửa giải đục cho đến khi ngừng chảy. Điều chỉnh pH của dịch rửa giải đục thu được đến 3,5 bằng axit axetic băng. Đun nóng nhanh dung dịch trong nồi cách thủy đến 95 độ, duy trì nhiệt độ này trong 3 phút, sau đó làm nguội nhanh dung dịch và để trong tủ lạnh qua đêm. Tóm tắt: Chiết xuất Oxytocin [HAc, Cột Zeolit tổng hợp] → Dịch rửa giải đục [HAc, Gia nhiệt] → Dung dịch tách → Hấp phụ & Rửa giải. Vào ngày hôm sau, lọc dung dịch đã làm lạnh. Vào dịch lọc, thêm huyền phù bentonite 10% trong khi khuấy (thêm 3 mL huyền phù cho mỗi 100 mL dịch lọc). Tiếp tục khuấy trong 1 giờ để tạo điều kiện hấp phụ, sau đó ly tâm hỗn hợp. Kiểm tra chất lỏng nổi phía trên bằng dung dịch thuốc thử axit sulfosalicylic; không có kết tủa chứng tỏ quá trình hấp phụ đã hoàn tất. Nếu quá trình hấp phụ không hoàn toàn, hãy lặp lại quy trình xử lý bentonite; sau đó, kết hợp các kết tủa bentonite thu được từ cả hai bước hấp phụ. Bentonite được rửa giải bốn lần bằng axit axetic 1% (với thể tích lần lượt là 1,6 L, 1,4 L, 1,2 L và 0,8 L). Đối với mỗi dịch rửa giải, *tert*-butyltriclorua được thêm vào sau khi dung dịch được đun nóng đến 80 độ; sau đó nhiệt độ được nâng lên 95 độ, làm lạnh nhanh đến 25 độ và được lọc hoặc ly tâm. Bốn dịch lọc thu được được kết hợp để xác định hiệu lực và giới hạn vasopressin. Quy trình như sau: Dung dịch làm lạnh [Lọc] → Lọc [Bùn Bentonite] → Chất hấp phụ [1% HAc] → Rửa giải. Chuẩn bị thuốc tiêm Oxytocin:
Dung dịch oxytocin đã phân tích đáp ứng tiêu chuẩn chất lượng sẽ được pha loãng đến nồng độ 5 U/mL hoặc 10 U/mL. Sau đó, nó được lọc qua phễu thủy tinh thiêu kết No. 4 hoặc No. 5, đổ vào ống tiêm và khử trùng bằng hơi nước chảy ở 100 độ trong 30 phút để thu được sản phẩm cuối cùng. Quy trình như sau: Dung dịch Oxytocin (Đã phê duyệt khảo nghiệm) [Lọc, chiết rót, khử trùng] → Tiêm Oxytocin.
Tái sinh Zeolite tổng hợp: Zeolite tổng hợp được rửa hai lần bằng nước cất. Sau đó, thêm 1,5 L nước (tính dựa trên 500 g zeolite) và 150 g natri clorua, khuấy hỗn hợp trong 2 giờ để rửa sạch và loại bỏ vasopressin. Zeolite sau đó được rửa bằng nước cất cho đến khi không còn ion clorua. Một lượng nước thích hợp được thêm vào và độ pH được điều chỉnh thành 9 bằng cách sử dụng natri hydroxit; hỗn hợp được khuấy trong 30 phút, sau đó phần nổi phía trên được gạn. Zeolite được rửa bằng nước cất, độ pH được điều chỉnh đến 5,5–6 bằng axit sulfuric và được rửa lại bằng nước cho đến khi gần như trung tính. Sau đó, nó được lọc để loại bỏ nước dư thừa và sấy khô ở 105 độ để sử dụng sau này. Trước khi sử dụng, thêm một lượng nước thích hợp và điều chỉnh độ pH bằng axit axetic băng trong khi khuấy để ngâm. Chuẩn bị bùn Bentonite 10%: Bentonite và nước được trộn với tỷ lệ khối lượng-to{18}}thể tích là 1:10. Hỗn hợp này được nghiền trong khoảng 1 giờ, trong thời gian đó axit axetic được thêm vào để duy trì độ pH ổn định ở mức 3,5. Bùn thu được sau đó được bảo quản trong tủ lạnh để sử dụng trong tương lai. Phương pháp 2: Tổng hợp hóa học. Đầu tiên, amit heptapeptide (các đoạn 3–9) được tổng hợp bắt đầu từ este benzyloxycarbonyl-leucine *p*-nitrophenyl; tiếp theo, benzyloxycarbonyl-S-benzylcysteine-tyrosine azide (đoạn 1–2) được tổng hợp; và ở bước thứ ba, oxytocin được tổng hợp.